測(cè)定意義
亞硝酸鹽廣泛存在于水體和土壤中，不僅是有機(jī)氮分解的重要中間產(chǎn)物，也可能來(lái)自污染。人體攝入過(guò)量后，可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。
測(cè)定原理
在酸性條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物，再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物，在540nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、酶標(biāo)儀、96孔酶標(biāo)板，蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，室溫保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
樣品處理
1. 土壤樣品：準(zhǔn)確稱取過(guò)篩后的土壤越0.5g，加入0.5mL 提取液，室溫震蕩1h，8000rpm，25℃離心15min，靜置，待其分層后，取上清液待測(cè)。
2. 水樣：直接檢測(cè)；如果渾濁，可以離心后再測(cè)定。
測(cè)定步驟和操作表
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| 空白管 | 測(cè)定管 |
| 樣品（mL） |
| 0.05 |
| 試劑一（mL） | 0.1 | 0.1 |
| 試劑二（mL） | 0.1 | 0.1 |
| H2O | 0.05 |
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| 混勻，室溫靜置15min，以空白管調(diào)零，測(cè)定A540 | ||
亞硝酸鹽含量計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y= 0.011x + 0.0216，R2= 0. 9991
（1）土壤樣品：NO2-（μmoL/g）=×（A540測(cè)定管 - 0.0216）×0.5÷樣品質(zhì)量
（2）水樣：NO2-（μmoL /mL）=×（A540測(cè)定管 - 0.0216）
注意事項(xiàng)
1. 試劑盒2-8℃保存。
2. 本測(cè)定對(duì)于溫度沒(méi)有特別要求。
3. 試劑對(duì)人體有一定的危害，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴手套操作。
