產(chǎn)品簡介：
DB3.1 大腸桿菌菌株基因組中含有 gyrA462 基因，賦予其對 ccdB 毒性基因的抗性，特別適用于構(gòu) 建或擴繁含有 ccdB 基因的質(zhì)粒載體（例 GATEWAY System vector) ，此菌株具有鏈霉素抗性。DB3.1 感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng) pUC19 檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
操作說明：
1、DB3.1 感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰 中），加入目的 DNA 并用指尖輕輕撥打管底混勻(避免用槍吸打)，冰上靜置 25 分鐘。
2、42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3、向離心管中加入 700μl 不含抗生素的 2YT 或 LB 無菌培養(yǎng)基，混勻后 37℃，200 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘。
4、5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB 培養(yǎng)基上。
5、將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項：
1、感受態(tài)細胞最好在冰中緩慢融化，插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目標 DNA，不可在冰中放置時間過長，長 時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2、混入目的 DNA 時應(yīng)輕柔操作。
3、轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
儲存條件： -80℃
用途： 克隆感受態(tài)細胞
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