| 胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。該消化液經(jīng)過過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的解離。本制品具有方便快速的特點，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。 | ||
儲存 | ||
| 長期保存放置于-20℃，保存2年，一經(jīng)融化后放置于4℃保存，可放置6個月，避免反復(fù)凍融。 | ||
操作方法 | ||
| 1. 貼壁細(xì)胞的消化： a) 吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。 b) 加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同。 c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。 d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。 e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。 2. 組織的消化： 不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。?注意事項?1.在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。 2. 胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。 | ||
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