| 15min高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒采用獨(dú)特的裂解液，可在15min內(nèi)快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的DNA，最大限度的去除蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)污染。應(yīng)用本試劑盒獲取的DNA純度高，無(wú)抑制劑，A260/A280為1.6-1.9。應(yīng)用本試劑盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反應(yīng)、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。 | ||||||||||||||||
組分 | ||||||||||||||||
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注意事項(xiàng) | ||||||||||||||||
| （1） 本試劑盒中的Washing Buffer中已經(jīng)加乙醇，無(wú)需單獨(dú)添加。 （2）gDNA LB1，儲(chǔ)存時(shí)可能會(huì)有白色結(jié)晶沉淀，放置于56℃水浴鍋溶解后，不影響使用效果。 （3）蛋白酶K（20 mg/ml）長(zhǎng)期保存請(qǐng)儲(chǔ)存于-20℃，短期室溫保存（6個(gè)月），其它組分儲(chǔ)存于室溫。 | ||||||||||||||||
儲(chǔ)存 | ||||||||||||||||
| 室溫避光保存，可儲(chǔ)存兩年。 | ||||||||||||||||
實(shí)例 | ||||||||||||||||
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| 圖：應(yīng)用高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒（H）、A公司、T公司和Q公司的血液提取試劑盒分別按其說(shuō)明書提取人外周血樣品的DNA，提取的血液量分別為250μl和500μl。 | ||||||||||||||||
使用方法 | ||||||||||||||||
| （1）樣本處理（1.5 ml EP管中處理） 抗凝全血：吸取200~500 μl抗凝全血加入到800 ul紅細(xì)胞裂解液中上下顛倒混合均勻，13000rpm離心30s，去上清，留細(xì)胞沉淀，用50μl水重懸細(xì)胞沉淀。 淋巴細(xì)胞分離液分離出的白細(xì)胞：直接吸取50μl白細(xì)胞。 有核紅細(xì)胞抗凝全血（禽血）：吸取5 μl抗凝全血加入到50 μl無(wú)菌水中，漩渦震蕩混合均勻。 （2）向上述準(zhǔn)備好的樣品溶液中加入100 μl gDNA LB1和20 μl蛋白酶K漩渦混合均勻10s，56℃水浴鍋中消化5min。 （3）加入700 μl gDNA BB2漩渦震蕩混合均勻1min，13000rpm離心3min。 （4）將上清液倒入到吸附柱中，13000rpm離心1min。 （5）倒掉廢液。向吸附柱中加入500 μl Washing Buffer，13000rpm離心15s。重復(fù)此步驟一次。 （6）將吸附柱重新放回離心機(jī)，13000rpm空離心2min，將殘留的乙醇徹底甩干。 （7）將吸附柱芯放入到1.5ml收集管中，向吸附柱芯中加入60~150 μl DNA Elution Buffer（DNA Elution Buffer預(yù)熱到65℃將提高洗脫產(chǎn)量），室溫放置1min，13,000rpm離心1min，洗脫液即為基因組DNA，冷凍保存。 | ||||||||||||||||
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