| RTS（Room Temperature Stable）系列感受態(tài)細(xì)胞為HaiGene獨(dú)有的化學(xué)感受態(tài)專利技術(shù)制備，其室溫可保存3天、-20°C可保存2年（推薦保存溫度）、-80°C可長(zhǎng)期保存性能無(wú)下降。運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需干冰，可常規(guī)冰袋運(yùn)輸（推薦運(yùn)輸溫度）。RTS克隆感受態(tài)細(xì)胞均為熱激感受態(tài)細(xì)胞，專用于TA/平端/酶切連接的載體構(gòu)建（不可用于無(wú)縫克隆載體構(gòu)建），經(jīng)42°C熱激1min可獲得106～108cfu/μg效價(jià), 該系列感受態(tài)細(xì)胞使用簡(jiǎn)單、運(yùn)輸、儲(chǔ)存方便。 | ||||||||
組分 | ||||||||
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應(yīng)用 | ||||||||
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、DNA克隆、DNA測(cè)序 | ||||||||
儲(chǔ)存 | ||||||||
| RTS系列感受態(tài)為干粉形式，均可室溫保存3天，長(zhǎng)期保存-20°C（2年）。經(jīng)Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受態(tài)必須分裝后，并于-60°C以下保存。溶解后的感受態(tài)細(xì)胞避免反復(fù)凍融，在-60°C以下可保存6個(gè)月。 | ||||||||
操作方法 | ||||||||
| 1.從-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent徹底融化，放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支凍干感受態(tài)細(xì)胞中，并分裝到10支1.5 ml EP管中（每支30 μl），于-60°C以下保存（或立即使用）。 2. 將5 μl連接產(chǎn)物加入到分裝的感受態(tài)細(xì)胞中，輕彈EP管（或槍頭輕輕吹打），置于冰上15min。 3. 置于42°C熱激1min后，迅速置于冰上急冷2min。 4. 熱激完畢后，向上述感受態(tài)細(xì)胞中加入450 μl不含抗生素的SOC（或LB）培養(yǎng)基，37°C振蕩（225 rpm）培養(yǎng)60min。使質(zhì)粒上抗性標(biāo)記基因表達(dá)，菌體復(fù)蘇。 5. 取200 μl復(fù)蘇菌液涂布到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂平板表面。 6. 將平板置于37°C培養(yǎng)，12~18小時(shí)后可出現(xiàn)菌落。 | ||||||||
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