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His標(biāo)簽純化樹(shù)脂(Ni-NTA Resin)

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Ni-NTA純化樹(shù)脂,Ni-NTA Resin,是用于純化6xHis標(biāo)簽重組蛋白的一種純化介質(zhì),它是由4%交聯(lián)的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. Ni-NTA樹(shù)脂用于在非變性或變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的6xHis標(biāo)簽重組蛋白。NTA,含有四個(gè)螯合區(qū),較一般的三齒螯合劑能更好的結(jié)合Ni2+。6xHis可與Ni2+螯合,從而使His標(biāo)簽蛋白結(jié)合在Ni-NTA純化介質(zhì)上,未結(jié)合的蛋白被洗滌下去,結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白經(jīng)過(guò)一定濃度的咪唑或低PH緩沖液被溫和的洗脫下來(lái),從而得到高純度的目的蛋白。
His標(biāo)簽純化樹(shù)脂

組分

50%的懸浮液(20%乙醇),已螯合Ni2+

主要特征

  • 該純化介質(zhì)與His標(biāo)簽蛋白具有極高的親和力,可達(dá)5~20 mg/ml。
  • 可在非變性和變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)所得的His標(biāo)簽蛋白。
  • 純化程序簡(jiǎn)單,所得的蛋白純度可高達(dá)95%。
  • Ni-NTA Resin可再生4-6次,重復(fù)使用。

應(yīng)用

  • His標(biāo)簽蛋白的純化。
  • 蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究。
  • 蛋白-蛋白以及蛋白-DNA之間相互作用的研究。
  • 配體-受體之間相互作用的研究。

儲(chǔ)存

4°C保存,切勿凍存。

實(shí)例

Ni-NTA純化樹(shù)脂 Fig.PET28a系統(tǒng)于BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá)蛋白。M:中分子量蛋白Marker(C0101),泳道1-5分別為:未誘導(dǎo)全菌蛋白,加IPTG誘導(dǎo)全菌蛋白,過(guò)柱液,洗滌液,洗脫液
 
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