| SUMO蛋白酶，也稱為UIP蛋白酶，是一種具有較高活性的半胱氨酸蛋白酶，來源于酵母編碼的MIP1基因，其特異性識(shí)別UBL蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)－SUMO（Small Ubiquitin-Like Modifier）。SUMO蛋白酶能夠識(shí)別完整的SUMO序列，并依賴正確的蛋白質(zhì)構(gòu)象，僅有完整的序列，沒有正確的結(jié)構(gòu)，SUMO酶是不能對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行切割的。因此，該酶是目前切割特異性最好的蛋白酶，可在較廣泛的作用溫度和PH范圍（pH7-9）內(nèi)發(fā)揮作用，切割的最佳溫度為30°C。SUMO蛋白酶的識(shí)別序列如下，切割位點(diǎn)位于QIGG之后 SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG 本公司生產(chǎn)的SUMO蛋白酶含有雙His標(biāo)簽，酶切后，可通過Ni-NTA Resin親和純化，很容易地將SUMO去除。雙His標(biāo)簽保證了，SUMO蛋白酶高親和力的結(jié)合Ni-NTA，以最大限度的去除SUMO蛋白酶。該SUMO蛋白酶分子量約26kD，比活>10E5/mg。 | ||||||||||
組分 | ||||||||||
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單位定義 | ||||||||||
| 在1XSUMO Protease Buffer-Salt (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% Igepal, 1 mM DTT)中，30°C反應(yīng)1h，剪切>85％的2 μg對(duì)照底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。 | ||||||||||
應(yīng)用 | ||||||||||
| 融合蛋白標(biāo)簽剪切去除。 | ||||||||||
儲(chǔ)存 | ||||||||||
| SUMO蛋白酶置于-70°C可保存2年；-20°C可保存6個(gè)月，避免反復(fù)凍融；10×SUMO Buffer置于-20°C保存即可。 | ||||||||||
實(shí)例 | ||||||||||
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| Fig: 分別用2μl和5μl的SUMO蛋白酶（C0801）對(duì)100 μg SUMO酶切對(duì)照融合蛋白（C0801P）進(jìn)行酶切1h或3h，如圖所示。M：Protein Marker，泳道1：純化后的SUMO-A蛋白； 泳道2：2μl SUMO Protease 酶切1h產(chǎn)物；泳道3：5μl SUMO Protease 酶切1h產(chǎn)物； 泳道4：2μl SUMO Protease 酶切3h產(chǎn)物；泳道5：5μl SUMO Protease 酶切3h產(chǎn)物。 | ||||||||||
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