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TEV 蛋白酶

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TEV蛋白酶(重組型)是經(jīng)過基因工程改造后的重組蛋白酶,它可特異性識別Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,并高特異性、高活性剪切(剪切位點(diǎn)在Gln-Gly之間)。TEV蛋白酶經(jīng)6XHis標(biāo)簽純化而得(含組胺酸標(biāo)簽),純度達(dá)99%,剪切反應(yīng)完畢后可通過Ni-NTA Resin(Cat.No.: C0401, HaiGene)去除。TEV酶在4℃-30℃溫度、pH范圍(6.0-8.5)反應(yīng)條件下均具有活性(見下表)。
不同溫度下剪切活性(%)
  4℃ 16℃ 21℃ 30℃
0.5 h 34 58 56 70
1 h 58 80 78 90
2 h 71 99 99 99
3 h 84 99 99 99

組分

組分名稱 數(shù)量
rTEV Protease (10 U/μl) 100 μl
20XrTEV Buffer 1 ml
0.1M DTT 100 μl

單位定義

在1XrTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1mM DTT),30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。

應(yīng)用

融合蛋白標(biāo)簽剪切去除。

儲存

長期儲存-70℃,可儲存2年,-20℃可儲存6個月。

實(shí)例

TEV蛋白酶
Fig: 重組表達(dá)的SUMO-TEV-Y融合蛋白經(jīng)rTEV酶切后去除SUMO融合標(biāo)簽。M:Protein Marker,泳道1:純化后的SUMO-TEV-Y蛋白; 泳道2:1μl TEV Protease 酶切1h產(chǎn)物;泳道3:1μl TEV Protease 酶切3h產(chǎn)物。
 
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