T7 核酸內(nèi)切酶I識別并切割不完全配對 DNA、十字型結(jié)構(gòu) DNA、Holliday 結(jié)構(gòu)或交叉 DNA、異源雙鏈 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈 DNA。T7核酸內(nèi)切酶I切割錯配堿基 5´ 端的第一、第二或第三個磷酸二酯。本產(chǎn)品是通過克隆重組表達T7核酸內(nèi)切酶I基因,獲得的高純度蛋白,該酶無其他內(nèi)切酶或外切酶污染。 | |||||||
組分 | |||||||
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單位定義 | |||||||
在 50 μl 反應(yīng)體系,37℃ 條件下,1 小時將 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型結(jié)構(gòu)的 pUC(AT)* 轉(zhuǎn)化成 90% 以上的線性結(jié)構(gòu)所需要的酶量定義為一個活性單位。 | |||||||
應(yīng)用 | |||||||
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1X T7 Endonuclease I Buffer | |||||||
50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)。 | |||||||
酶保存液 | |||||||
50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。 | |||||||
儲存 | |||||||
置于-20°C,可保存2年,避免反復(fù)凍融。 | |||||||
注意事項 | |||||||
(1) T7 核酸內(nèi)切酶 I 是一種具有底物結(jié)構(gòu)選擇性的酶;該酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物,必須控制酶量和反應(yīng)時間。 (2)反應(yīng)溫度超過42℃時,會增加非特異性核酸酶活性。 |
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