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細(xì)胞裂解液

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 產(chǎn)品概述 product description

細(xì)胞裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制,對動物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用,是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。 本細(xì)胞裂解液裂解得到的蛋白樣品主要用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。 可以提供針對動物細(xì)胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。 針對細(xì)胞膜、核、胞質(zhì)、線粒體、溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、外泌體等細(xì)胞不同部位的蛋白提取試劑盒。 可以提供針對下游實(shí)驗(yàn)不同應(yīng)用的試劑盒,例如用于Western Blotting和雙向電泳等不同下游應(yīng)用的試劑盒;含去垢劑成分和不含去污劑成分的蛋白提取試劑盒;專用于蛋白質(zhì)譜檢測、Pull-down實(shí)驗(yàn)的試劑盒等總計(jì)300多種蛋白提取試劑盒供選擇使用。還可以提供針對動物、植物等不同樣本的細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、葉綠體、外泌體等不同細(xì)胞器的提取試劑盒。

保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
 
有效期
1年
檢測方法
WB、IP等
適用樣本
細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、 使用方便,從細(xì)胞,組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨、反復(fù)凍融、超聲破碎等前處理。
2、 提取過程簡單方便,將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
3、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
4、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
5、 總蛋白提取液含多種有效成分,可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可結(jié)合釋出的蛋白防止沉淀。
6、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產(chǎn)品應(yīng)用
WB、IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機(jī)/勻漿器
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液 (pH7.4,實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
 離心管
 吸頭
 一次性手套
使用注意事項(xiàng)
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
2.實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過程保持低溫操作,縮短離心時(shí)間。
使用方法
A. 細(xì)胞裂解
1. 裂解液制備:
每1ml冷的細(xì)胞裂解液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細(xì)胞,在4℃,1000g條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,盡可能吸干,收集細(xì)胞。
3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液,混勻后,在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃,12000-14000g條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,用于下游實(shí)驗(yàn)。

B. 組織裂解
1. 裂解液制備:
每1ml冷的細(xì)胞裂解液加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本用手術(shù)剪刀剪碎,加入1ml裂解液,用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿液在4℃振蕩15-25分鐘。
4. 在4℃,12000-14000g條件下離心15分鐘。
5. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,用于下游實(shí)驗(yàn)。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/div>
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