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人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述

平滑肌即無紋肌的通稱,平滑肌是由長紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官,而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素(肌層)。平滑肌細(xì)胞互相連接,形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官;在功能上可以通過縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動和變形,也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,使器官對抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。

支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過程有關(guān),如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時,可以檢測到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大,表型也發(fā)生改變,由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型,并分泌多種與細(xì)胞因子;而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項(xiàng):  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1)  細(xì)胞來源于人正常支氣管組織。

2) 細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長方式:長梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)基。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

產(chǎn)品使用

(1)本產(chǎn)品僅能用于科研

(2)本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核

(3)本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核

 

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