中文名稱小鼠胰島素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 

英文名稱Mouse insulin elisa kit 

樣品類型血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/尿液/組織樣本 

檢測(cè)范圍0.17-5.5 ng/mL 

靈敏度0.09 ng/mL 

反應(yīng)時(shí)間3.5h 

 

背景介紹:

胰島素是糖代謝中最主要的激素之一。胰腺的3細(xì)胞島細(xì)胞產(chǎn)生胰島素前體 蛋白，前體蛋白被加工成C肽和胰島素。它們以等摩爾濃度進(jìn)入血循環(huán)中。成熟的 胰島素由A、B兩條鏈組成。這兩條鏈?zhǔn)峭ㄟ^兩個(gè)二硫鍵橋接形成有功能的胰島 素分子。血漿葡萄糖濃度的變化是胰島素產(chǎn)生并分泌的最主要刺激因素，產(chǎn)生的 胰島素具有一些代謝調(diào)節(jié)作用。其最主要的作用是，將外周血中糖轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟中 貯存起來。一些諸如肝糖生成障礙或在促進(jìn)血糖升高的激素諸如胰高血糖素、腎 上腺素、生長激素和皮質(zhì)醇等作用下促進(jìn)肝糖分解都可拮抗胰島素的作用。

［檢測(cè)原理:

Solarbio(Solarbio*)ELISA試劑盒采用基于雙抗體夾心法的醯聯(lián)免疫吸附檢 測(cè)技術(shù)。胰島素捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)同時(shí)加入標(biāo)本或參考品和HRP 耦連的抗小鼠胰島素抗體時(shí)，其中胰島素的不同位點(diǎn)會(huì)與捕獲抗體和HRP偶聯(lián) 的抗小鼠胰島素抗體結(jié)合，形成夾心復(fù)合物，錨定在固相載體板上，其它游離的 成分通過洗滌的過程被除去。最后加入顯色劑，若樣本中存在胰島素將會(huì)形成免 疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液 后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測(cè)，使其450nm處的OD值，胰島素濃度與OD450值之 間呈正比，通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照未知樣本中OD值，即可算出標(biāo)本中胰 島素濃度。

 

2. 靈敏度：

最低可檢測(cè)小鼠Insulin濃度達(dá)0.1ng/ml,

20個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)品濃度OD的平均值加上兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差，計(jì)算相應(yīng)的可檢測(cè)濃度。

3. 特異性：

不與IGF-U IGF-IU小鼠C肽、大鼠C肽反應(yīng)，與豬胰島素、綿羊胰島素、大鼠胰 島素、牛胰島素及人胰島素分別有628%, 256%, 146%, 110%和195%交叉反 應(yīng)。

4. 重復(fù)性：

板內(nèi)，板間變異系數(shù)＜10%

5. 回收率：

在選取的健康小鼠血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入3個(gè)不同濃度水平的小鼠Insulin計(jì) 算回收率。

I樣本類型	平均回收率(%)	范圍(%)I
血漿	93	86-101
細(xì)胞培養(yǎng)上清	95	87-103

 

6. 線性稀釋：

分別在選取的4份健康小鼠血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入高濃度小Mlnsulin,在標(biāo) 準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋，評(píng)估線性。

 

I稀釋比例	回收率(%)	血漿	細(xì)胞培養(yǎng)上清I
1:2	平均回收率(% )	96	102
	范圍(％)	88-105	92-113
1:4	平均回收率(% )	98	103
	范圍(％)	90-107	94-112

 

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過期的試劑。

2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在2-8P冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。

3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù)30min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的 樣品。

4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。

5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用1次性試管，槍頭，封板膜（淤）及潔凈塑料容 器。

6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到 管壁及瓶蓋上，使用前清離心處理（5-10S即可），使管壁上的液體集中在管底 部，取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。

7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒 內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。

8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

I安全提示:

試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù)； 在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請(qǐng)用大量滑水滑 洗；檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí)，請(qǐng)按國家生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī) 定執(zhí)行。

說明書

1份

1份

 

自備實(shí)驗(yàn)器材（不提供，可代購）1

1. 酶標(biāo)儀（主波長450nm,參考波長630nm）

2. 高精度移液器及一次性吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000 n I

3. 洗板機(jī)或洗瓶

4.