產(chǎn)品簡介:基底膜是動物體內(nèi)上皮細胞基底面的一層基質(zhì)膜。該基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠腫瘤組織提取的基底膜成分,所形成的基質(zhì)膠。該基質(zhì)膠主要成分為laminin,collagen IV,heparan sulfate proteoglycans(Kleinman et al. 1986)。同時,該基質(zhì)膠也包含多種生長因子,例如表皮生長因子EFG,血小板衍生生長因子PDGF,神經(jīng)生長因子NGF,堿性成纖維細胞生長因子FGF-2,乙型轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF(Vukicevic et al. 1992)。
產(chǎn)品來源:
Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠腫瘤基底膜成分
產(chǎn)品儲存:
建議您融化后先按照單次用量進行分裝,保存-20°C冰箱,有效期2年。
產(chǎn)品性質(zhì):
本品在4°C條件下為液態(tài),但在加熱到37°C時呈凝膠狀態(tài);|(zhì)膠凝固后,重新放回4°C過夜,基質(zhì)膠可再次液化。
注意事項:
該基質(zhì)膠在溫度高于10°C時就會開始凝固成膠,所以盡量在冰上操作基質(zhì)膠。類器官傳代時,如果為了避免酶對類器官造成影響,可直接用4°C預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基對基質(zhì)膠進行緩慢吹打,即可將類器官從基質(zhì)膠中釋放出來。
產(chǎn)品應(yīng)用:
本品適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學(xué)研究,體內(nèi)和體外血管生成實驗。
操作方法:
類器官培養(yǎng)(操作所需時間為1小時)
1.將基質(zhì)膠于4°C冰箱里的冰浴中過夜解凍。
2.將24孔板放置于培養(yǎng)箱預(yù)熱。
3.用預(yù)冷的槍頭將解凍的基質(zhì)膠進行分裝。
4.準備病人或者動物組織(或者類器官)來源的,細胞總數(shù)為1X10^5的單細胞懸液。300g離心5min。
5.取50µL的該基質(zhì)膠與離心所得的細胞進行混勻。
6.取出預(yù)熱的24孔板,立即將基質(zhì)膠與細胞的混合物滴加在孔板里,立即將24孔板放入培養(yǎng)箱。
7.約10min后,基質(zhì)膠凝固后,向孔板里加入500µL類器官培養(yǎng)基,放于培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
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