產(chǎn)品概述 product description
細菌裂解液采用優(yōu)質原料配制,用于細菌菌體的裂解,用于細菌蛋白提取,裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western等下游實驗。 本裂解液提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本裂解液提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本裂解液中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。 本裂解液提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分,不可直接用于2D電泳,如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳,請使用其他貨號的試劑盒。也可以將最后樣品除鹽后再用于2D電泳,用脫鹽柱脫鹽處理。 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。 可以提供針對細胞膜、核、胞質、線粒體、溶酶體、高爾基體、內質網(wǎng)、外泌體等細胞不同部位的蛋白提取試劑盒。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.蛋白定量試劑盒
吸頭
一次性手套
2.實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
根據(jù)所需要提取的樣本量,每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2. 在4℃, 10000g條件下將菌液離心5min,棄上清,盡量吸干剩余液體,收集菌體.
3. 用PBS洗菌體2次。若為冷凍菌體直接進行下面操作步驟即可。
4. 按每50-100mg濕重菌體樣本加入500ul裂解液,吹打混勻,置搖床室溫振蕩30-45分鐘。
5. 在4℃, 10000g條件下將裂解液離心5分鐘,將上清移入干凈離心管。
6. 即得到細菌蛋白樣品。
7. 將細菌總蛋白樣品定量后分裝置于-80℃冰箱或直接用于下游實驗。
處理部分組織樣本時可能沒有裂解完全,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。最好在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結構,沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構象和活性。