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大鼠滑膜成纖維細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述


滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤(rùn),由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu),除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過(guò)關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。

滑膜分泌滑液,在關(guān)節(jié)活動(dòng)中起重要作用。正;し譃閮蓪,即薄的細(xì)胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層),是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜,貼附于非關(guān)節(jié)面部分,覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上,不在軟骨面上,此部分稱(chēng)為邊緣區(qū)或“裸區(qū)”。滑膜呈粉紅色,光滑發(fā)亮、濕而潤(rùn)滑,有時(shí)可見(jiàn)絨毛,內(nèi)含膠原性纖維。

滑膜細(xì)胞有A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞,表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體,具有吞噬功能;B型成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS) ,有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu),是介導(dǎo) RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項(xiàng):收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠的正常膝關(guān)節(jié)滑膜組織。

2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
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