- 商品詳情
- 售后服務
- 相關(guān)文獻
-
K599 Chemically Competent Cell100μl/支¥ 1580100 個
K599 Chemically Competent Cell是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。K599發(fā)根農(nóng)桿菌(NCPPB2659)含有pRi2659農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(葫蘆科,豆科,茄科等),同時具有鏈霉素抗性。
基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type)
K599 Chemically Competent Cell產(chǎn)品說明
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。K599發(fā)根農(nóng)桿菌(NCPPB2659)含有pRi2659農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(葫蘆科,豆科,茄科等),同時具有鏈霉素抗性。本公司生產(chǎn)的K599化學轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pCAMBIA2301質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測,轉(zhuǎn)化效率>103 cfu/μg DNA。
常規(guī)操作方法
1.取-80℃保存的K599發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2. 每100μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,一次使用前做預實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手快速、劇烈打管底混勻或用槍吹吸混勻,依次放于冰中靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 冰浴中拿出放室溫,加入700μl 無抗生素的TY液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2小時。
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3 天
● 農(nóng)桿菌相關(guān)抗生素配方:
常用農(nóng)桿菌抗性: (R:抗;S:敏感。)
● TY配方(1L):
Tryptone 5g
Yeast extract 3g
補水到1L體積,*溶解后,121度、20分鐘高溫滅菌
配制1M的氯化鈣水溶液,121度、20分鐘高溫滅菌
每1L 滅菌的TY液體營養(yǎng)液中加入10ml 無菌的1M氯化鈣水溶液即可。
若配制TY固體培養(yǎng)基,則加入15g 瓊脂粉。
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
2. 混勻質(zhì)粒時應用手指快速打管底或用槍吹吸混勻,務必使質(zhì)粒快速、均勻分散開,與感受態(tài)細胞充分接觸。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質(zhì)粒用量或降低涂板的菌量。
4. K599具有鏈霉素抗性,不可用于具有鏈霉素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。
試驗前請仔細閱讀說明書,本產(chǎn)品僅供科研實驗使用。
1. 所購產(chǎn)品均質(zhì)量保證!
2. 試劑盒方面提供技術(shù)指導,Elisa試劑盒還可以提供代檢測服務。
3.本公司出售的任何產(chǎn)品均保質(zhì)保量,除以下情況,客戶可聯(lián)系我公司申請退換貨售后服務
以下情況不予辦理退換貨:
1、已超過受理期限的產(chǎn)品,如過保質(zhì)期。
2、由于客戶自身操作原因?qū)е聦嶒炇 ?br>
3、由于客戶沒有仔細確認要訂購的指標,導致自己的指標定錯。
4、產(chǎn)品已使用(質(zhì)量問題除外)。
文獻名稱