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*0F` Chemically Competent Cell100μl/支¥ 1080100 個
*0F`: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
基因型
F´{lacIq Tn10 (TetR)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
*0F` Chemically Competent Cell產(chǎn)品說明
*0F`菌株來源于*0菌株。將F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子轉(zhuǎn)入*0菌株,即為*0F`。該F`因子攜帶lacIq 抑制子,可抑制trc,tac,lac等啟動子下游基因的表達,從而可以用于一些表達毒性蛋白質(zhì)粒的擴繁。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。可用于構(gòu)建克隆,藍白斑篩選(如用于藍白斑篩選,需在培養(yǎng)基中加入IPTG誘導的表達)實驗,具有四環(huán)素抗性。*0F`感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
操作方法
1. *0F`感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì);蜻B接產(chǎn)物) 并用手打EP管底輕輕混勻,冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì);蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。
試驗前請仔細閱讀說明書,本產(chǎn)品僅供科研實驗使用。
1. 所購產(chǎn)品均質(zhì)量保證!
2. 試劑盒方面提供技術指導,Elisa試劑盒還可以提供代檢測服務。
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1、已超過受理期限的產(chǎn)品,如過保質(zhì)期。
2、由于客戶自身操作原因?qū)е聦嶒炇 ?br>
3、由于客戶沒有仔細確認要訂購的指標,導致自己的指標定錯。
4、產(chǎn)品已使用(質(zhì)量問題除外)。
文獻名稱