一.樣本處理
非蛋白氮樣本:取6mL樣本原液,加入3.6mL水,1.2mL10%鎢酸鈉溶液,1.2mL0.33mol/L硫酸,混勻后靜置30min,3000g離心取上清。
二.樣品消解
1.取非蛋白氮樣本10mL加入消化管,加入3g硫酸鉀與0.2g硫酸銅,同時(shí)取空消化管兩支,用移液管分別往每管中加入10mL濃硫酸,輕輕晃動(dòng)消化管。
2.將20支消化管全部置于石墨消解儀上,打開(kāi)石墨消解儀,溫度設(shè)置為:曲線加熱150℃,30min;280℃,20min;400℃,60min。前30min不蓋排廢蓋子,揮去水分。若結(jié)束后樣本未消解至澄清,則繼續(xù)消解至澄清。
3.關(guān)閉石墨消解儀,待樣品冷卻后關(guān)掉廢氣回收系統(tǒng)。
三.全氮測(cè)定
1.將滴定酸桶,硼酸桶,堿桶,蒸餾水桶管路按照標(biāo)示插好(滴定酸桶的管子應(yīng)插到底部),將硼酸桶,堿桶,蒸餾水桶的液位檢測(cè)插好。
2.打開(kāi)定氮儀與循環(huán)水系統(tǒng),進(jìn)入清洗界面,先進(jìn)行兩次硼酸清洗管路,再進(jìn)行一次換酸清洗,一次堿管路清洗。
3.裝一只空的消化管,關(guān)好防護(hù)門(mén)。點(diǎn)擊【測(cè)試】菜單系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入操作模式界面,選擇【自動(dòng)測(cè)試】,常規(guī),設(shè)置參數(shù)為:樣品編號(hào);樣品重量:0.000g。滴定酸濃度:標(biāo)定好的鹽酸濃度(mol/L);空白值:0.000mL;蛋白系數(shù):樣品固定的轉(zhuǎn)換系數(shù)。硼酸:15ml;稀釋水:20mL;堿液:0mL;蒸餾:5min;設(shè)置完成后,點(diǎn)擊【確定】即可進(jìn)入自動(dòng)測(cè)試功能。
4.測(cè)試完成后打印測(cè)定結(jié)果。
5.打開(kāi)安全門(mén),戴棉質(zhì)手套取出消化管,放入樣品空白管,關(guān)好防護(hù)門(mén)。點(diǎn)擊【測(cè)試】菜單系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入操作模式界面,選擇【自動(dòng)測(cè)試】,常規(guī),堿液參數(shù)設(shè)置為40mL,其余參數(shù)同步驟3,重復(fù)步驟3。
6.樣品測(cè)定:設(shè)置參數(shù)為:樣品編號(hào);樣品重量:5g。滴定酸濃度:標(biāo)定好的鹽酸濃度(mol/L);空白值:兩支空白管滴定用酸量的平均值,mL;蛋白系數(shù):樣品固定的轉(zhuǎn)換系數(shù)。硼酸:15ml;稀釋水:20mL;堿液:40mL;蒸餾:5min;設(shè)置完成后,點(diǎn)擊【確定】即可進(jìn)入自動(dòng)測(cè)試功能。
7.測(cè)試完成后打印測(cè)定結(jié)果。
8. 進(jìn)行儀器清洗,然后關(guān)閉循環(huán)水系統(tǒng)及定氮儀,然后清潔儀器。
四.注意事項(xiàng)
1. 禁止使用邊緣有缺口,或者有裂縫的消化管進(jìn)行消解,消解時(shí)蓋子放置好,以免廢氣泄露,消解儀工作狀態(tài)盡量不要靠近儀器,但是要經(jīng)常觀察管內(nèi)變化,若出現(xiàn)異常情況,立即斷電。
2. 開(kāi)始蒸餾時(shí),消化管中液體的總體積以不超過(guò)總體積的1/3。
3. 拿取消化管時(shí),注意高溫燙傷。放置消化管時(shí),左右旋轉(zhuǎn)幾下,確保消化管與蒸餾頭密封。
4. 每日做完實(shí)驗(yàn)要用洗瓶沖洗蒸餾頭殘余堿液,儀器前部的槽皿中,如果積有液體,請(qǐng)擦洗干凈。
5. 為了延長(zhǎng)防濺裝置的使用壽命,請(qǐng)每天工作結(jié)束后清洗兩次左右:即消化管加水150mL空蒸5分鐘。(空蒸儀器把加堿量設(shè)置為“0”)。
6. 關(guān)機(jī)前,需將接收杯內(nèi)液體排凈,儀器使用結(jié)束后要關(guān)閉水源、電源,儀器上要放置一空消化管(防止防濺裝置內(nèi)殘留液體流到儀器上)。
7. 做完實(shí)驗(yàn)將消解管清洗干凈(包括壁內(nèi)和壁外),然后放烘箱烘干,烘干后若長(zhǎng)時(shí)不用則收起來(lái)。消解儀各部位上若有硫酸殘留需及時(shí)擦拭干凈一面被腐蝕,消解儀蓋子以及托盤(pán)需長(zhǎng)清洗保持潔凈。