1 適用范圍
有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑盒適用于檢測(cè)新鮮蔬菜中的有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。
2 檢測(cè)依據(jù)
試劑盒使用方法依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199-2003 《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》。
3 試劑盒組成
| 序號(hào) | 名稱 | 規(guī)格(100T) | 規(guī)格(200T) | 規(guī)格(500T) |
| 1 | 顯色劑 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 2 | 底物 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 3 | 膽堿酯酶 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 4 | 緩沖試劑濃縮液 | 1瓶 | 1瓶 | 1瓶 |
| 5 | 說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
4 溶液配制
4.1緩沖溶液：取500 mL純凈水，加入5 mL緩沖試劑濃縮液，混勻備用，室溫保存；
4.2膽堿酯酶：無需配制，使用時(shí)直接取100 μL，4℃冷藏保存；
4.3顯色劑：無需配制，使用時(shí)直接取100 μL，4℃冷藏保存；
4.4底物：加入10 mL純凈水溶解，使用時(shí)直接取100 μL，4℃冷藏保存。
5 樣品提取
選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土等雜物后取樣。葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣品，果菜從不同個(gè)體的表皮處取樣。
葉菜取2克1 cm見方葉尖部分于樣品杯中，莖類及水果取3克1 cm見方表皮于樣品杯中；加入10 mL緩沖液，震蕩1-2 min；倒出提取液或過濾液，靜置2 min待測(cè)。
蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、番茄汁液等樣品中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí)，可采取整株（體）蔬菜浸提；一些含葉綠素較高的蔬菜時(shí)，也可采取整株（體）浸提的方法，減少色素干擾。
6 有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑盒操作步驟
6.1對(duì)照測(cè)試
在一支干凈試管中分別加入2.5 mL緩沖溶液，100 μL顯色劑，100 μL膽堿酯酶，混勻；37℃恒溫設(shè)備中放置10分鐘后加入100 μL底物，搖勻并立即倒入比色皿，用農(nóng)殘檢測(cè)儀進(jìn)行對(duì)照測(cè)試。
6.2樣品測(cè)試
在另一支干凈試管中分別加入2.5 mL樣品提取液，100 μL顯色劑，100 μL膽堿酯酶，混勻；37℃恒溫設(shè)備中放置10分鐘后加入100 μL底物，搖勻并立即倒入比色皿，用農(nóng)殘檢測(cè)儀進(jìn)行樣品測(cè)試。儀器根據(jù)測(cè)定結(jié)果顯示出抑制率。
操作提示：在加底物的環(huán)節(jié)中，可預(yù)先將底物加入比色皿中，待恒溫靜置10分鐘時(shí)間一到，馬上將反應(yīng)管中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色皿中，并迅速放入測(cè)試通道進(jìn)行測(cè)試，這樣可以減少同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過長(zhǎng)而造成的誤差。
7 結(jié)果判定
以分光光度計(jì)測(cè)試時(shí)，于412 nm處測(cè)定吸光度值在3分鐘內(nèi)的變化，按以下計(jì)算公式算出抑制率：
抑制率（%）=[(△A0-△At)/ △A0]×100%
以農(nóng)殘檢測(cè)儀檢測(cè)時(shí)，其抑制率＞50%時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽性，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。對(duì)于陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上，如有必要，可用其他方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
8有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
8.1酶活性要求：本試劑盒中酶正常活性△A0≥0.3，符合國(guó)標(biāo)方法要求；
8.2使用：任何試劑應(yīng)遵循使用一瓶配制一瓶原則，用前應(yīng)搖勻，用完后才是用新試劑，防止變質(zhì)；
8.3試劑只出不入原則：從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次吸入瓶?jī)?nèi)，以免交叉污染；
8.4對(duì)色素干擾嚴(yán)重的過濾液，可用活性碳脫色處理，過濾或離心后，取清液作為樣品提取液。
9 貯存條件與有效期
9.1保存：試劑盒應(yīng)保存于4℃冰箱，保質(zhì)期12個(gè)月，常溫保存3個(gè)月；
