| 支原體檢測 | 虎紅細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌 | 傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) |
| 細(xì)胞背景 | 紅細(xì)胞(Erythrocytes，RBC)也稱紅血球，是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞，是脊椎動物體內(nèi)通過血液運送氧氣的最主要的媒介，同時還存在免疫功能。紅細(xì)胞可以運輸氧氣，也可以運輸二氧化碳。運輸二氧化碳時血液呈暗紫色，運輸氧氣時則呈鮮紅色。紅細(xì)胞會生成于骨髓之內(nèi)。紅細(xì)胞老化后，易導(dǎo)致血管堵塞，所以會自動返回骨髓深處，由白細(xì)胞負(fù)責(zé)銷毀;或是在經(jīng)過肝臟時，被巨噬細(xì)胞分解，成為膽汁。哺乳動物的紅細(xì)胞呈兩面中央凹的圓餅狀，中央較薄。周緣較厚，故在血涂片標(biāo)本上中央染色較淺、周圍較深。新鮮單個紅細(xì)胞為黃綠色，大量紅細(xì)胞使血液呈深紅色。成熟的紅細(xì)胞（哺乳動物）沒有細(xì)胞核和線粒體，富含血紅蛋白。依靠葡萄糖合成能量，平均直徑為9um。 | ||
| 分離方法 | 通過無菌采集抗凝血，離心后獲得紅細(xì)胞沉淀，經(jīng)等量PBS洗滌 2-3次至上清透亮，最終用PBS緩沖液配置不同濃度的紅細(xì)胞 | ||
收貨處理：取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度：細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳，建議收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗
傳代比例：首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。
重要提醒
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3.傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后，首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照），記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑颍糠旨?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正�，F(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)；
3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)；
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)；
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)；
6.細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)；
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)；
5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)；
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)；
7.視具體情況而定。
