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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自尾動(dòng)脈組織;尾動(dòng)脈是鼠尾的主要血管,尾部主要大血管分布表淺,尾側(cè)靜脈適于注射給藥,尾正中動(dòng)脈適于動(dòng)脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等,實(shí)際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動(dòng)物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富,供血來源于薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈兩個(gè)動(dòng)脈,形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點(diǎn),尾部淺層 3 套縱向動(dòng)靜脈系統(tǒng),鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動(dòng)靜脈鏈狀結(jié)構(gòu),深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,且呈動(dòng)靜脈血管徑不匹配的特點(diǎn)。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈。其在尾部依尾橫動(dòng)脈形成溝通。尾橫動(dòng)脈呈尾椎節(jié)段性分布,直接溝通尾正中動(dòng)脈、尾深動(dòng)脈和皮支。在尾部被橫斷后,可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動(dòng)靜脈回流通路; 鼠尾存在動(dòng)靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動(dòng)脈,而正中動(dòng)脈明顯大于伴隨的靜脈,形成供血主要來自腹面的尾正中動(dòng),回血主要依靠?jī)蓚?cè)的尾側(cè)靜脈,符合腹面動(dòng)脈保護(hù)的安全性,同時(shí)利于血管散熱,尾橫動(dòng)脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻(xiàn)[王蕾,葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。
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方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
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質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳1-2代 消化液 0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 小鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。