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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人外周血B淋巴細(xì)胞分離自外周血;B淋巴細(xì)胞的祖細(xì)胞存在于胎肝的造血細(xì)胞島中,此后B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生和分化場(chǎng)所逐漸被骨髓所代替。B淋巴細(xì)胞簡(jiǎn)稱B細(xì)胞,成熟的B細(xì)胞主要定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)淺層的淋巴小結(jié)和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結(jié)內(nèi)。B細(xì)胞在抗原刺激下可分化為漿細(xì)胞,漿細(xì)胞可合成和分泌抗體(免疫球蛋白),主要執(zhí)行機(jī)體的體液免疫。與T淋巴細(xì)胞相比,它的體積略大。這種淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,會(huì)增殖分化出大量漿細(xì)胞。漿細(xì)胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)。從骨髓來的干細(xì)胞或前B細(xì)胞,在遷入法氏囊或類囊器官后,逐步分化為有免疫潛能的B細(xì)胞。成熟的B細(xì)胞經(jīng)外周血遷出,進(jìn)入脾臟、淋巴結(jié),主要分布于脾小結(jié)、脾索及淋巴小結(jié)、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結(jié)中,受抗原刺激后,分化增殖為漿細(xì)胞,合成抗體,發(fā)揮體液免疫的功能。
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方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血B淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法結(jié)合磁珠分選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
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質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血B淋巴細(xì)胞經(jīng)CD19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含IL-2、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào) P24331 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細(xì)胞形態(tài) 圓形 傳代特性 不建議傳代 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 人外周血B淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
- 發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
- 三、使用方法
- 人外周血B淋巴細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈圓形,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞不建議傳代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
- 客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
- 1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
- 2. 懸浮細(xì)胞處理
- 1)收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;
- 2)1200-1500rpm離心8min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀;
- 3)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞;將分散好的細(xì)胞調(diào)整合
- 適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);4)待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
- 四、注意事項(xiàng)
- 1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個(gè)月。
- 2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
- 3. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳
- 盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
- 4. 該細(xì)胞只可用于科研。
- 備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考