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細胞簡介：
小鼠外周血淋巴細胞分離自外周血；所謂的外周血，即除骨髓之外的血液，就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血，它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細胞或未被釋放入循環(huán)的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL，主要是血液循環(huán)中的淋巴細胞，由T細胞和B細胞組成，其中T細胞(占70%～80%)和B細胞(占20%～30%)。
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方法簡介：
實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10⁶cells/瓶。
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質(zhì)量檢測：
實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號 P24332 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細胞形態(tài) 圓形 傳代特性 不增殖；不傳代 消化液 0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 小鼠外周血淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
- 細胞培養(yǎng)狀態(tài)
- 發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
- 三、使用方法
- 小鼠外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈圓形，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞不增殖；不傳代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
- 客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
- 1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
- 2. 懸浮細胞處理
- 1）收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液；
- 2）1200-1500rpm離心3min，棄上清，收集細胞沉淀；
- 3）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞；將分散好的細胞調(diào)整合
- 適密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
- 4）若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2）中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結(jié)束后，加入胰
- 酶抑制劑(或血清）終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞；1200rpm離心5min，棄上清，收集細胞沉淀；
- 5）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
- 6）待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察，用于實驗；之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
- 四、注意事項
- 1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。
- 2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
- 3. 消化過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
- 4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐�別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳
- 盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
- 5. 該細胞只可用于科研。特殊注意事項
- 6. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失；懸浮細胞因多數(shù)胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)或增加離心時間3-5min，增加細胞獲取量。
- 備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考
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