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小鼠脊髓星形膠質細胞

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  1. 細胞簡介:

    小鼠脊髓星形膠質細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區(qū),主要由神經(jīng)細胞構成;在灰質區(qū)周圍為白質區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結構和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內含神經(jīng)絲、微管、內質網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內質網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。

  2. 方法簡介:

    實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質細胞采用胰蛋白酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。

  3. 質量檢測:

    實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質細胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

  4. 培養(yǎng)信息:

    培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
    產(chǎn)品貨號 P24337
    換液頻率 每2-3天換液一次
    生長特性 貼壁
    細胞形態(tài) 梭形、多角形
    傳代特性 可傳3代左右
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

    小鼠脊髓星形膠質細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

    發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

    三、使用方法

    人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在技術部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

    客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

    2. 懸浮細胞處理

    1)收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀;

    3)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    4)若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結束后,加入胰

    酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm離心5min,棄上清,

    收集細胞沉淀;

    5)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察,用于實驗;之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

    四、注意事項

    1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。

    2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

    3. 消化過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

    4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

    5. 該細胞只可用于科研。

    特殊注意事項

    6. 此細胞為懸浮細胞,請注意不要直接倒掉,造成損失;懸浮細胞因多數(shù)胞體較小,離心收集時,請注意懸液中細胞是否收集完全,可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5min,增加細胞獲取量。

    備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考

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