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細胞簡介：
雞外周血單核細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞，并在骨髓中發(fā)育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較，單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細胞體積繼續(xù)增大，直徑可達50-80μm，細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素，參與機體防衛(wèi)機制，還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂，并包圍異物。
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方法簡介：
實驗室分離的雞外周血單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
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質(zhì)量檢測：
實驗室分離的雞外周血單核細胞經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號 P24417 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 半貼壁半懸浮 細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣 傳代特性 不增殖；不傳代 消化液 0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 雞外周血單核細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈圓形，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞不增殖；不傳代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 懸浮細胞處理
1）收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液；
2）1200-1500rpm離心3min，棄上清，收集細胞沉淀；
3）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞；將分散好的細胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4）若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2）中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結(jié)束后，加入胰
酶抑制劑(或血清）終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞；1200rpm離心5min，棄上清，
收集細胞沉淀；
5）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
6）待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察，用于實驗；之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 消化過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐�別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
特殊注意事項
6. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失；懸浮細胞因多數(shù)胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)或增加離心時間3-5min，增加細胞獲取量。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考
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