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兔雪旺氏細胞

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  1. 細胞簡介:

    兔雪旺氏細胞分離神經(jīng)組織;周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質細胞稱施萬(schwann,又名雪旺細胞)細胞,它沿神經(jīng)元的突起分布。施萬細胞包裹在神經(jīng)纖維上,這種神經(jīng)纖維叫有髓神經(jīng)纖維。有髓神經(jīng)纖維和無髓神經(jīng)纖維的施萬細胞的形態(tài)和功能有所差異,施萬細胞的外表面有基膜,能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,促進受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形,其長軸與軸突平行,核周有少量胞質。由于施萬細胞包在軸突的外面,故又稱神經(jīng)膜細胞(neurilemmalcell),它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經(jīng)膜(neurilemma),光鏡下可見此膜。在有髓神經(jīng)纖維發(fā)生中,伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝,軸突位于縱溝內,溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突,把胞質擠至細胞的內、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜,屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質除見于細胞的外、內邊緣和兩端外,還見于髓鞘板層內的施-蘭切跡。該切跡構成螺旋形的胞質通道,并與細胞外、內邊緣的胞質相通。

  2. 方法簡介:

    實驗室分離的兔雪旺氏細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。

  3. 質量檢測:

    實驗室分離的兔雪旺氏細胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

  4. 培養(yǎng)信息:

    培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
    產品貨號 P24478
    換液頻率 每2-3天換液一次
    生長特性 貼壁
    細胞形態(tài) 雙極、多極形
    傳代特性 可傳1-2代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

    兔雪旺氏細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

    發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

    三、使用方法

    人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在技術部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

    客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

    2. 懸浮細胞處理

    1)收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀;

    3)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    4)若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結束后,加入胰

    酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm離心5min,棄上清,

    收集細胞沉淀;

    5)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察,用于實驗;之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

    四、注意事項

    1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。

    2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

    3. 消化過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

    4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

    5. 該細胞只可用于科研。

    特殊注意事項

    6. 此細胞為懸浮細胞,請注意不要直接倒掉,造成損失;懸浮細胞因多數(shù)胞體較小,離心收集時,請注意懸液中細胞是否收集完全,可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5min,增加細胞獲取量。

    備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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