產(chǎn)品概述
| 產(chǎn)品描述 | 外泌體分離試劑盒（沉淀法）是一款沉淀法外泌體分離試劑盒，可用于多種樣本的外泌體分離，具有操作簡便、分離速度快和外泌體回收率高等特點(diǎn)。本試劑盒分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。 |
| 分離方法 | 聚合物沉淀法 |
| 產(chǎn)品優(yōu)勢 | 1. 適用樣本廣 血漿、血清等復(fù)雜樣本和細(xì)胞上清、尿液等簡單樣都都適用； 2. 回收率高 相較于其他方法，獲取的外泌體濃度高； 3. 操作簡便 不需特殊設(shè)備，操作簡便； 4. 快速 外泌體分離僅需1.5 h； 5. 重復(fù)性好 基本無操作熟練度要求； 6. 高通量 能同時(shí)處理多個(gè)樣本。 |
| 運(yùn)輸條件 | 冰袋運(yùn)輸 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 保質(zhì)期 | 18個(gè)月 |
產(chǎn)品組分
| 規(guī)格 | 組分名稱 | 含量 | 保藏溫度 |
| 20 Tests/50 Tests | Exosome Precipitation Solution | 10 mL/25 mL | 2-8℃ |
| 20 Tests/50 Tests | Solution A | 25 mL/25 mL | 2-8℃ |
自備儀器耗材
使用方法
1. 準(zhǔn)備工作
1) 去試劑盒中2-8℃保存組分（Exosome Precipitation Solution、Solution A）從冰箱拿出，恢復(fù)至室溫。
2) 建議選擇新鮮樣本；如果樣本保存在-80℃，請?jiān)?/span>37℃水浴鍋中解凍，備用。
2. 樣品預(yù)處理
1) 去除細(xì)胞。4℃，300 g，離心5 min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管；
注意：對無細(xì)胞的樣品，可以跳過此步驟。
2) 去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片。4℃，2000 g，離心10 min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管；
3) 去除大體積顆粒。步驟 2）得到的上清，4℃，14000 g，離心30 min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管。
注意：去除大體積顆粒（大囊泡）的替代方法：將步驟 2）得到的上清，經(jīng)0.2 μm微孔濾膜過濾，收集濾出液。
3. 沉淀外泌體
1) 根據(jù)外泌體樣本類型，選擇合適的操作方案：
l 血清、血漿外泌體樣本操作方案
取預(yù)處理后樣品500 μL到1.5 mL離心管，加入500 μL Solution A混勻，然后再加入250 μL Exosome Precipitation Solution，上下顛倒充分混勻；
注意：如果需要調(diào)整血清/血漿外泌體樣品體積，可以按樣本：Solution A：Exosome Precipitation Solution = 2：2：1的體積比，等比例放大或縮小。
l 細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液外泌體樣本操作方案
取預(yù)處理后樣品1 mL到1.5 mL離心管，加入250 μL Exosome Precipitation Solution，上下顛倒充分混勻；
a. 若樣品體積過大，可以濃縮到1-2mL后，再進(jìn)行該步驟。
b. 如果需要調(diào)整細(xì)胞培養(yǎng)上清 / 尿液外泌體樣品體積，可以按樣本：Exosome Precipitation Solution = 4：1的體積比，等比例放大或縮小。
2) 室溫孵育30min (快速流程)；
注意：如果時(shí)間充裕，推薦4℃ 孵育過夜 (高回收流程)。
3) 置于離心機(jī)4℃，12000 g離心30 min，棄上清。
注意：吸棄或小心傾倒上清后，用200 μL移液器盡可能吸凈上清。
4. 回收外泌體
1) 外泌體重懸。向上述沉淀中加入200 μL Solution A，用移液器輕柔上下吹打混勻；
2) 收集外泌體顆粒。將重懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管，4℃ 12000 g 離心5 min，保留上清液，該
上清液中富含外泌體顆粒。
注意：若沉淀較多，取離心后上清液，12000 g，5 min，離心多次，直至無明顯沉淀，獲取上清液即為外泌體。
3) 分離的外泌體可立即開展后續(xù)實(shí)驗(yàn)。24 h內(nèi)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，可4℃保存；否則分裝后保存在-80℃。
