一、產(chǎn)品簡介1. 產(chǎn)品名稱:兔外周血巨噬細胞2. 組織來源:外周血3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105 cells/T25細胞培養(yǎng)瓶4. 細胞簡介:兔外周血巨噬細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。本公司生產(chǎn)的兔外周血巨噬細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁、細胞因子誘導法制備而來,細胞總量約為5×105 cells/瓶;細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。5. 培養(yǎng)基信息:RPMI-1640培養(yǎng)基,含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等我們推薦使用兔外周血巨噬細胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)兔外周血巨噬細胞的培養(yǎng)基。二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片三、使用方法此細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存,請您收到細胞后盡快進行相關實驗。客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。3. 細胞傳代1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;2) 添加12mM利多卡因消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余利多卡因消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;3) 用吸管輕輕吹打混勻,按適當?shù)拿芏戎苯咏臃N實驗器皿,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);4) 待細胞完全貼壁后,直接用于實驗;每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。四、注意事項1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。5. 該細胞只可用于科研。備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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