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pExpress-1-Fcer2(rat)質(zhì)粒的操作流程

發(fā)布時(shí)間:2021/12/8 10:44:50      閱讀次數(shù):485

 pExpress-1-Fcer2(rat)質(zhì)粒
基本信息:
平臺(tái)編號(hào):zl-052260
別稱: NM_001033924.1;CD23; Fcer2a
復(fù)制子: pUC
克隆菌株: DH5a
培養(yǎng)條件: 37度

操作流程
pExpress-1-Fcer2(rat)質(zhì)粒譜圖到貨后請(qǐng)根據(jù)標(biāo)簽上文字判斷產(chǎn)品屬性(質(zhì)粒/甘油菌)
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;
 2、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;
 3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;
 4、42℃熱激90s,再冰浴2min;
 5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;
 6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
 7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
 8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
 9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。

   目前保存各類載體資源超過20000余種 ,質(zhì)粒微生物約5000株,另外我們還代理國(guó)外微生物菌種資源,如addgene,安捷倫,thermo,atcc等。


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