1. 取 1.5 ml 離心管（自備），加入 20 μl 的 Proteinase K 溶液。
2. 向離心管中加入 200 μl 血清、血漿、病毒拭子保存液或病毒原液、無(wú)細(xì)胞體液等，再
加入 200 μl Buffer GL，渦旋震蕩充分混勻。
3. 56℃孵育 10 min，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 μl 無(wú)水乙醇，渦旋震蕩 15 sec，室溫放置 5 min，使溶液溫度降至室溫，短
暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
(注意：如果環(huán)境溫度超過(guò) 25℃，無(wú)水乙醇應(yīng)在冰上預(yù)冷后使用。)
5. 將一個(gè)吸附柱放入收集管中，將上一步所得溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12,000 rpm 離
心 30 sec，棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer RW1，室溫 12,000 rpm 離心 30 sec，棄收集管中濾液。
（注意：在 Buffer RW1 濃縮液中按要求加入無(wú)水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl 的 Buffer RW2，室溫 10,000 rpm 離心 30 sec，棄收集管中濾液。
（注意： Buffer RW2 按要求加入無(wú)水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)；如需進(jìn)一步提高核酸純
度，可重復(fù)步驟 7 一次。）
8. 室溫 12,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留液體。
（注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會(huì)影響基因組 DNA/RNA 的后續(xù)使用）
9. 將離心吸附柱置于一個(gè)干凈的離心管中，小心打開(kāi)吸附柱的蓋子，室溫放置 2 min，
使吸附膜完全變干。
10. 加入 30 - 100 μl Buffer RE 或 DEPC-H2O（自備），室溫放置 2 min。
1
2,000 rpm 離心 1 min，
離心管底溶液即病毒 DNA/RNA。
（注意：為增加洗脫效率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min，再次離心收集）
注意事項(xiàng)
樣品避免反復(fù)凍融，否則會(huì)使蛋白變性或產(chǎn)生沉淀，導(dǎo)致提取的 DNA/RNA 片段小，提
取量下降。
如 Buffer GL、Buffer RW1 結(jié)晶或產(chǎn)生沉淀，可在 56℃水浴溶解。
所有離心步驟均為室溫下操作。
