皮質(zhì)酮是由腎上腺皮質(zhì)在垂體激素ACTH的控制下通過負反饋機制分泌的。由于缺乏酶C17-羥化酶，它在大鼠中是循環(huán)中最多的類固醇，因為嚙齒動物無法合成人類主要的糖皮質(zhì)激素——皮質(zhì)醇。

皮質(zhì)酮在嚙齒動物中具有廣泛的活性。它調(diào)節(jié)碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪的代謝。它還對造血系統(tǒng)有影響，并且會減少淋巴細胞和嗜酸性粒細胞的總數(shù)，但程度小于皮質(zhì)醇。與皮質(zhì)醇相比，皮質(zhì)酮的抗炎活性非常小。

夜行性動物如大鼠的皮質(zhì)酮水平表現(xiàn)出明顯的晝夜變化，在一天的后半部分達到峰值，隨后在早晨降至最低點（1），并且被認為在睡眠-覺醒周期中起重要作用（2）。這與白天活動的哺乳動物相反，在它們身上，糖皮質(zhì)激素的峰值濃度出現(xiàn)在早晨。已經(jīng)觀察到，在基礎(chǔ)和壓力條件下，與雄性大鼠相比，雌性大鼠的皮質(zhì)酮釋放增加（6）。

測定大鼠體內(nèi)的皮質(zhì)酮對于進行神經(jīng)生理學(xué)研究的設(shè)施、學(xué)術(shù)機構(gòu)以及擁有藥物研究部門的制藥公司都有興趣。影響內(nèi)分泌系統(tǒng)的藥物可以增加或減少腎上腺皮質(zhì)的皮質(zhì)類固醇產(chǎn)量。因此，大鼠血清中的皮質(zhì)酮是潛在治療劑副作用的理想指標(biāo)。在大鼠身上看到的同樣的效果通常也在人類身上看到。大鼠的血漿皮質(zhì)酮通常與ACTH測量一起用作壓力指標(biāo)（3,4）。慢性壓力對下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)功能的影響是年齡依賴的。最近的研究表明，衰老增加了大腦中皮質(zhì)酮的基礎(chǔ)水平，但并沒有增加壓力誘導(dǎo)的水平（5）。

小鼠/大鼠皮質(zhì)酮ELISA是一種競爭性免疫測定方法，用于定量小鼠和大鼠血清或血漿中皮質(zhì)酮的測定。僅供研究使用。不是為了用于診斷程序

皮質(zhì)酮（小鼠/大鼠）ELISA檢測原理：

小鼠/大鼠皮質(zhì)酮ELISA試劑盒是一種固相酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），基于競爭性結(jié)合原理。未知量的皮質(zhì)酮樣品中存在一定量的與辣根結(jié)合的皮質(zhì)酮過氧化物酶競爭皮質(zhì)酮抗血清的結(jié)合位點微孔板。在搖床上孵育后，將微孔板洗滌四次。添加后底物溶液皮質(zhì)酮的濃度與光學(xué)測量密度。

提供的試劑：

1. 微孔板

12 x 8（可拆分）條，共96孔；孔涂有兔抗皮質(zhì)酮多克隆抗體。

2. 校準品0

1瓶，0.3 mL，即用型。

3. 校準品（校準品1-5）

5瓶，每瓶0.3 mL，即用型；濃度：15, 50, 185, 640, 2250 ng/mL。

 孵育緩沖液

4. 1瓶11 mL，即用型。

5. 酶結(jié)合物

1瓶，7 mL，即用型；皮質(zhì)酮與辣根過氧化物酶結(jié)合。

6. 底物溶液

1瓶，22 mL，即用型；

含有四甲基聯(lián)苯胺（TMB）和過氧化氫的緩沖基質(zhì)。

7. 終止液

1瓶，7 mL，即用型；含有2N鹽酸溶液。

8. 洗滌液

1瓶，50 mL（10倍濃縮）；參見“試劑的準備”。

需要但未提供的材材料

? 離心機

? 能夠進行450 nm終點測量的微孔板讀取器

? 轉(zhuǎn)速超過600 rpm的微孔板混合器

? 漩渦混合器

? 校準的可變精度微量移液器（10 ?L, 50 ?L, 100 ?L, 200 ?L, 1000 ?L）

? 吸水紙

? 蒸餾水或去離子水

? 計時器

? 半對數(shù)圖表紙或用于數(shù)據(jù)整理的軟件

試劑準備

使用前所有試劑應(yīng)處于室溫。

洗滌液：將50 mL的10倍濃縮洗滌液用450 mL去離子水稀釋至最終體積500 mL。

稀釋后的洗滌液在室溫下至少穩(wěn)定3個月。

儲存條件

在2°C至8°C下儲存，未開封的試劑可保持穩(wěn)定直至過期日期。不要使用超過該日期的試劑。開封后的試劑必須儲存在2°C至8°C。首次開封后，如果使用和儲存得當(dāng)，試劑可穩(wěn)定30天。微孔板必須儲存在2°C至8°C。確保鋁箔袋密封嚴實。

典型校準器曲線示例：

以下數(shù)據(jù)僅用于說明，不應(yīng)用于計算以下結(jié)果

皮質(zhì)酮（小鼠/大鼠）ELISA文獻參考：

1. D?Agostino J, Vaeth GF & Henning SJ (1982): Diurnal rhythm of total and free concentration of serum corticosterone in the rat. Acta Endocrinologica 100, Vol. 1, 85-90.

2. Vázquez-Palacios G et al. (2001): Further definition of the effect of corticosterone on the sleep-wake pattern in the male rat. Pharmacol. Biochem. Behav. 70: 305-310.

3. De Souza EB & van Loon GR (1982): Stress induced inhibition of the plasma corticosterone response to a subsequent stress in the rat: A nonadrenocorticotropinmediated mechanism. Endocrinology 110, 1: 23-33.

4. Kant GJ, Leu JR, Anderson SM & Mougey EH (1987): Effects of chronic stress on plasma corticosterone, ACTH and prolactin. Physiology & Behaviour 40, 6: 775-779.

5. Garrido P, de Blas M, Del Arco A, Segovia G & Mora F (2010): Aging increases basal but not stress-induced levels of corticosterone in the brain of the awake rat. Neurobiol Aging.2010 Apr 21.

6. Handa RJ, Burgess LH, Kerr JE, O'Keefe JA (1994): Gonadal Steroid Hormone Receptors and Sex Differences in the Hypothalamo-Pituitary-Adrenal Axis. Hormon. Behav. 28 (4):464-76.