本產(chǎn)品是獨(dú)家開發(fā)的革命性的DNA膠回收試劑,其最大特點(diǎn)是可以直接從溶化的瓊脂糖凝膠中沉淀回收DNA,不使用離心吸附柱,沒有樣品轉(zhuǎn)移過程, 所以它能將對(duì)DNA的機(jī)械拉力降低到最低,尤其適合于回收長達(dá)5-50 Kb的大片段DNA(常規(guī)的離心吸附柱不能有效回收5 Kb以上DNA)。本產(chǎn)品操作流程如下
本產(chǎn)品主要特點(diǎn)是:
1.一管式操作,不需要離心吸附柱,過程中不需要轉(zhuǎn)移樣品,對(duì)DNA的機(jī)械破壞小。
2.適合于回收從100 bp到50 Kb的各種大小的DNA片段,包括用常規(guī)離心吸附柱方法不能有效回收的5 Kb以上的質(zhì)粒,BAC、基因組DNA等片段。
3.快速,整個(gè)過程不到15分鐘(對(duì)一個(gè)樣品而言),由溶膠(3分鐘),放置(2 分鐘),沉淀(5分鐘)和兩次洗滌(各1-2分鐘)幾步組成。
4.純度高,回收產(chǎn)物可以直接用于連接、酶切、PCR、測(cè)序等各種反應(yīng),不影響后續(xù)酶反應(yīng)。回收率高,一般在大于50%。
5.既可用于回收單雙鏈DNA,又可用于回收單雙鏈RNA。
使用及效果
按3:1的比例將溶液A和含DNA片段的瓊脂糖凝膠塊在離心管中混合(一片膠一般需要300 μL溶液A),65℃保溫3-10分鐘使膠融化,加入1倍體積(100 μL)的溶液B,充分混勻,室溫放2分鐘,13000 g室溫離心5分鐘,小心吸棄上清,加入
0.8mL溶液C,充分混勻,室溫13000 g離心2分鐘,再用0.2 mL溶液C重復(fù)洗滌步驟一次,小心吸棄上清后即得純化的DNA沉淀,溶于TE中待用。