ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,它在物質(zhì)運送、能量轉(zhuǎn)換以及信息傳遞方面具有重要的作用,機體在缺氧及一些疾病狀態(tài)下,此酶活力發(fā)生一系列改變,另外有些遺傳疾病也與此酶活力有關。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取樣本量100ul。
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗: X =103.3%。
6、受外界影響因素。焊蓴_因素少,重復性強。
7、測試面廣:可測動物組織、紅細胞以及各種培養(yǎng)細胞、各種水產(chǎn)等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為636nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、酶促反應:按說明操作加入樣本100l和混合試劑,37℃準確反應10分鐘
2、加R4,3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清
3、定磷:取上清液加入顯色劑,室溫靜置2分鐘加R6
4、室溫靜置5分鐘636nm波長,1cm光徑,比色