国产商清国产精品国产k_囯产亚州中文字幕日韩在线_国产福在线永久视频_欧美日有码视频√_天天躁夜夜躁狠狠久久kk_日韩中文字幕精品在线观看_毛片a级三毛片免费播放_亚州精品中文字幕乱码三区_国产在线电影一区_国产AV青青大帝

您好,歡迎光臨上海雅吉生物商城!
工作時(shí)間:9:00-18:00
全國(guó)服務(wù)熱線:021-34661276

BJ5183 感受態(tài)細(xì)胞

訂購(gòu)數(shù)量:
規(guī)格
價(jià)格庫(kù)存
訂購(gòu)熱線:021-34661276
我要詢價(jià)
  • 商品詳情
  • 售后服務(wù)
  • 相關(guān)文獻(xiàn)

 

  • 介紹: 基 因 型endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr)簡(jiǎn) 要 說(shuō) 明BJ5183是一種具有較高重組活力的大腸桿菌菌株,是目前腺病毒系統(tǒng)最常用的感受態(tài)細(xì)胞。BJ5183菌株含有sbcBC recBC雙重突變,賦予BJ5183細(xì)胞較強(qiáng)的重組能力,有利于轉(zhuǎn)入的目的基因與腺病毒質(zhì)粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3/E4 deleted)]}的重組。endA1(缺失核酸內(nèi)切酶)的突變有利于重組DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。Strr 賦予BJ5183菌株鏈霉素抗性。BJ5183感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>5×108 cfu/μg DNA。
  • 操 作 說(shuō) 明
  • 1.BJ5183感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒(含有目標(biāo)基因并線性化)和腺病毒質(zhì)粒,并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
  • 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
  • 3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
  • 4.5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
  • 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
  • 注 意 事 項(xiàng)
  • 1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
  • 2.混入目的DNA時(shí)應(yīng)輕柔操作。
  • 3.BJ5183菌株的質(zhì)粒產(chǎn)量不高。腺病毒構(gòu)建成功后,可選擇在其他大腸桿菌菌株中擴(kuò)繁,純化質(zhì)粒。
  • 4.BJ5183感受態(tài)細(xì)胞對(duì)溫度敏感,應(yīng)儲(chǔ)存在-80℃超低溫冰箱,避免溫度波動(dòng),溫度波動(dòng)會(huì)降低感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率。
  • 儲(chǔ)存條件: -80℃
  • 用途: 克隆感受態(tài)細(xì)胞
  • 注意:部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權(quán)威性,僅供客戶參考交流研究之用。
我要詢價(jià)
*聯(lián)系方式:
(可以是QQ、MSN、電子郵箱、電話等,您的聯(lián)系方式不會(huì)被公開(kāi))
*內(nèi)容:


微信客服
掃一掃立即咨詢


微信客服
掃一掃立即咨詢

銷售電話:

021-34661275

021-34661276

15301693058