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土壤有效硅試劑盒分光光度法

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 注意:正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。
土壤有效硅試劑盒分光光度法測定意義
硅元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素,土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用、呼吸作用以及對逆境的抗性。
測定原理
硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸,可被還原劑還原成硅鉬藍,在 700nm 有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀。
試劑組成和配制
提取液:液體 55mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入10mL試劑四溶劑充分溶解。
試劑四溶劑:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
樣本處理
新鮮土樣風干,過20目篩,按照土壤質量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取 1h,10000g ,25℃離心 10min,取上清液待測。
測定操作表

  空白管 測定管
樣本(μL)   200
提取液(μL) 200  
試劑一(μL) 200 200
混勻,35℃,15min
試劑二(μL) 200 200
混勻,25℃,10min
試劑三(μL) 200 200
試劑四(μL) 200 200
充分混勻,25℃靜置 30min
于 1mL 玻璃比色皿,蒸餾水調零,測定 700nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白管和 A測定管,△A=A 測定管-A 空白管

計算公式
標準曲線:y = 0.0933x-0.0523,R2=0.9992
有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0933×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 53.6×(△A+0.0523)÷W
V 反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取
液體積,1mL,W:樣本質量,g

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