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產(chǎn)品特點:
本試劑盒是本公司通用型 LAMP 試劑盒的基礎(chǔ)上開發(fā)的免 DNA 提取可視化 LAMP 試劑盒,它有下列特點:
1. 不需要專門提取 DNA,直接用細(xì)胞裂解將液進(jìn)行 LAMP,極大縮短了實驗。
2. 適用于病毒、細(xì)菌、真菌、植物、動物的各種形式的樣品,包括實體組織、液體樣品。
3. 使用 4×可視化 LAMP MagicMix,可視化肉眼檢測實驗結(jié)果。
4. 使用改良的 WarmStart Bst DNA 聚合酶,反應(yīng)特異性更強。
5. 高擴增效率更高,擴增效率可達(dá)到 10E9-10E10,比 PCR 靈敏一個數(shù)量級,可檢測到單拷貝的 DNA 分子。
6. 本試劑盒足夠 50 次 20uL 體系的免 DNA 提取 LAMP 擴增。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研目的。
運輸及保存 :低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法
1. 配制免 DNA 提取溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例:在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即得 1mL 溶液 A 工作液。一次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL工作液足夠 10 個樣品。沒用完的工作液可室溫放置,但最好在一周內(nèi)用完,不要長期放置。如果待測樣品數(shù)量為其他數(shù)字,配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。
2. 根據(jù)材料不同參考下表取少量樣品到一干凈的塑料離心管中。
注意:未列出樣品,用戶需要自己摸索最佳用量。對富含多醌多酚的植物材料(如棉花),組織使用量最好不要超過 0.5mg。
3. 加入 100uL 溶液 A 工作液,確保樣品被溶液淹埋。
4. 95℃保溫 10 分鐘。
5. 待冷卻到常溫后加入 20uL 溶液 B 并混勻得細(xì)胞裂解液原液。放冰上待用。如果暫時不用,可以放-20℃長期保存。如果是第一次用本產(chǎn)品測試某實驗材料時,不知道這些材料中有沒有 LAMP 反應(yīng)抑制劑,故建議取 10uL 細(xì)胞裂解液原液加 990uL 自備超
純水得 100 倍細(xì)胞裂解液稀釋液,再將 10uL 10 倍稀釋液加 990uL 超純水混勻得10000 倍稀釋液。第一次測試時需測此三個濃度的樣品,之后的實驗可固定選一個對反應(yīng)沒有抑制的濃度進(jìn)行實驗。
6. 配制自備的 5×LAMP 引物混合液。先加超純水(不要用 TE)將各引物干粉稀釋到母液濃度,然后在一新的離心管中按表中所列體積加入各種引物和超純水,最后得到1mL的 5×LAMP 引物混合液。如果需要配制的 5×LAMP 引物混合液體積大于或小于1mL,則各成分的用量請按比例調(diào)整。此混合液可以在-20℃放置 2 年