- Caspase家族活性的檢測
Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。在正常狀態(tài)下, Caspase家族都以無活性的酶原(30~50kD)形式表達(dá),當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時Caspase可以被蛋白酶裂解,大亞基和小亞基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase級聯(lián)反應(yīng),促發(fā)細(xì)胞凋亡。在目前已知的14種Caspase中,Caspase-3、8和9與凋亡的關(guān)系最為密切,在細(xì)胞凋亡中起執(zhí)行凋亡的作用。將Caspase序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán),當(dāng)該底物被特定的caspase剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來,可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(λ=405nm 或400nm)測定其吸光值,考察caspase的活化程度。
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