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小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述


 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,對(duì)骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)不僅有機(jī)械支持作用,還能分泌多種生長(zhǎng)因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來(lái)支持造血。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潛能,能促進(jìn)間充質(zhì)組織的再生,如:骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.1%,含量極低。而同時(shí),由于組織工程需要大量的種子細(xì)胞,從嚙齒類動(dòng)物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的BMSCs對(duì)組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)顯得至關(guān)重要。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項(xiàng):  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常骨髓血組織。

2) 細(xì)胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

 產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系(產(chǎn)品編號(hào):012)作為體外培養(yǎng)原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)基。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

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