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HotStart SD DNA 聚合酶

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SD DNA聚合酶是一種新型的Taq DNA聚合酶,該酶具有Bst聚合酶的強烈的鏈置換活性和Taq DNA聚合酶 的耐熱性能和聚合酶活性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高溫,且具有5'-3'聚合酶活性,5'-3'鏈置換活性 ,無外切酶活性,擴增速度4kb/min,最佳反應溫度為68℃,這些特征使得該酶廣泛適用于熱變性PCDR( Polymerase Chain Displacement Reaction)、LAMP反應、長片段擴增、富含GC片段擴增,還可用于全 基因組測序(WGA)、單細胞測序和NGS建庫等領(lǐng)域。
SD DN 聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的組合下可進行TaqMan探針的切割,用于qPCDR的擴增。這種qPCDR 的新型方案將槽式PCR的高靈敏特性放置于單管、一步擴增完成,這種檢測策略比qPCR靈敏度高10-100 倍,并且用時更短。
SD DNA 聚合酶采用了HaiGene的電子重構(gòu)架技術(shù),提高了該酶對乙醇、胍鹽 、肝素、血清、植物多糖 多酚的耐受性。熱啟動SD DNA聚合酶采用化學修飾,確保在50℃以下100%無活性,僅有90℃加熱5min以 后才能恢復酶活性,因此以降低低溫 狀態(tài)下的非特異性擴增。

主要特征

  • 同時具有強烈的鏈置換活性和聚合酶活性
  • 可耐受90℃高溫
  • 經(jīng)重構(gòu)架之后,具有耐受雜質(zhì)的特性
  • 擴增速度4kb/min,可很好的擴增長片段和復雜模板

單位定義

一個活力單位即在68°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

應用

  • 等溫擴增:LAMP,熱變性LAMP,tHDA和RCA
  • PCDR
  • PCR和定量PCR
  • 全基因組測序、單細胞測序、NGS文庫構(gòu)建

儲存

-20°C可保存2年。

反應實例

SD DNA聚合酶
Fig .以不同數(shù)量級的P72質(zhì)粒為模板進行PCR和PCDR擴增,引物分別為Inner Primer,Out Primer,Inner+Out Primer, 產(chǎn)物1為Out Primer F/R(248bp),產(chǎn)物2為Inner Primer F/Out Primer R(200 bp),產(chǎn)物3為OuT Primer F/Inner Primer R(164 bp),產(chǎn)物4為Inner Primer F/Inner Primer R(111 bp),1-5分別為10e5/10e4/10e3/10e2/10的P72質(zhì)粒,Marker為 DNA Marker 10,000。說明:應用SD DNA 聚合酶采用四引物的PCDR的靈敏度為標準PCR 的10倍左右。
 
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