T4 噬菌體復(fù)制分為依賴于起始子的起始復(fù)制和依賴于重組酶的復(fù)制。由起始復(fù)制產(chǎn)生的3'-ssDNA作為重組復(fù)制的第一步鏈侵入的組份, 該3'-ssDNA被T4 gp32 蛋白所覆蓋,同時將T4 UvsY募集到此;T4 UvsY作為T4 UvsX的loader將其運載至此,于此同時gp32被置換下來, UvsX和UvsY形成突觸結(jié)構(gòu), 然后侵入同源的雙鏈形成D-Loop, 一旦形成D-Loop, UvsX即被置換下來。D-loop被置換鏈作為滯后鏈合成的模板,很快被gp32結(jié)合。隨后, 解旋酶loader gp59與gp32覆蓋的DNA復(fù)制叉結(jié)合,將gp41/61運載至此, gp61蛋白合成寡核苷酸片段促進(jìn)滯后鏈DNA的合成,而gp41通過解旋模板而促進(jìn)先導(dǎo)鏈的DNA合成。最后,聚合酶的滑板蛋白T4 gp45蛋白和其loder蛋白 gp44/62與先導(dǎo)鏈相結(jié)合,促進(jìn)聚合酶gp43的組裝,T4 gp45蛋白將gp43運載至復(fù)制叉處后啟動先導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成,gp44/62隨后從復(fù)制叉處解離。因此, gp59作為解旋酶gp41的loader在gp41引導(dǎo)的DNA先導(dǎo)鏈合成中起到重要作用。 | ||||||
組分 | ||||||
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儲存 | ||||||
-20℃可保存3年。 | ||||||
Storage Buffer | ||||||
200 mM Tris-HCl,pH7.5 200 mM NaCl 5 mM DTT 25% Glycerol |
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