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Strep Tactin XT Resin

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Strep-Tactin XT(Strep-Tactin的升級產(chǎn)品)瓊脂糖凝膠FF 是一種將Strep-Tactin XT共價交聯(lián)在瓊脂糖凝膠微球上,形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該純化介質(zhì)主要用于純化Strep tag II 或Twin strep tag標(biāo)簽蛋白。Strep tag II 標(biāo)簽為8 個氨基酸的小標(biāo)簽(WSHPQFEK),由于標(biāo)簽小,僅為1kDa 左右,一般不影響融合后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,常用于融合表達(dá)蛋白質(zhì)的檢測和純化。
由于Strep-Tacin XT對Strep tag II 標(biāo)簽具有高度特異性,一步純化就能獲得高純度的蛋白質(zhì)樣品。Strep tag II 標(biāo)簽蛋白與凝膠結(jié)合后可使用脫硫生物素競爭方式進(jìn)行洗脫,該洗脫方式比較溫和,對蛋白影響極小。 由于Strep-Tactin對Strep tag II標(biāo)簽具有很強(qiáng)的吸附能力,在生物素的洗脫過程中不易完全洗脫,造成洗脫效率較低?梢酝ㄟ^在脫硫生物素洗脫液中添加25mM NaOH來提高蛋白回收效率,而添加NaOH后會造成Strep-Tactin從填料上脫落,進(jìn)而污染純化蛋白。本產(chǎn)品為升級的Strep-Tactin XT,其可耐受高濃度的NaOH洗脫(0.5M),除此外Strep-Tactin XT可耐受1%SDS、6M尿素,因此使用該填料可以在變性條件下純化標(biāo)簽蛋白。
Strep-Tactin XT Resin

組分

50%的懸浮液(20%乙醇)。

優(yōu)勢

Strep-Tactin Resin缺點 Strep-Tactin XT Resin優(yōu)點
(1)常規(guī)3mM D-biotin洗脫,洗脫效率較低。 (1) 可采用多種洗脫模式;高效的洗脫率,靈活的洗脫條件。
(2)填料再生成本高,需要HABA再生,再生時間長,再生后填料結(jié)合能力下降較多,一般難以再生3次以上。 (2)方便的填料再生方式,通?芍貜(fù)使用10次以上。
(3)不能在變性條件下純化蛋白。 (3)可以在變性條件下純化蛋白。
(4)洗脫蛋白中會有殘留脫落的Strep-Tactin蛋白 (4)洗脫產(chǎn)物中不含有脫落蛋白,獲得最高純度的蛋白制品。

主要技術(shù)指標(biāo)

基質(zhì)                4%瓊脂糖凝膠微球 PH耐受性               2~13
配基                Strep-Tactin XT 耐鹽性                    <2M NaCl
配基密度        >5 mg/ml SDS耐受性             <2%
粒徑                45~165 µM (還原劑耐受性       <10mM DTT,<0.1% beta-ME
結(jié)合蛋白量    ≥6 mg/ml 變性劑耐受性        <6M尿素

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