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T5核酸外切酶

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T5核酸外切酶沿5’→3’方向降解DNA,它可降解雙鏈DNA、單鏈DNA和缺刻的質(zhì)粒DNA。它既能從5’-末端起始降解DNA,也能從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的切刻或缺口處起始降解DNA,但不能降解超螺旋雙鏈DNA;谝陨咸匦,T5核酸外切酶可應(yīng)用于Gibson組裝。

單位定義

1單位指在50μl反應(yīng)體系,37℃條件下,30分鐘內(nèi)能從雙鏈DNA底物上催化產(chǎn)生1nmol的酸可溶性脫氧核糖核苷酸所需要的酶量。

組分

名稱(chēng) 數(shù)量
T5 Exonuclease (10U/μl) 100μl
10×T5 Exo Buffer 1ml

儲(chǔ)存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事項(xiàng)

(1)1× T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。該酶在PCR Buffer中也具有活性。
(2)該酶的最佳反應(yīng)溫度為37°C,在50°C也具有一定活性,因此可用于Gibson組裝。
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