產(chǎn)品簡介：基底膜是動(dòng)物體內(nèi)上皮細(xì)胞基底面的一層基質(zhì)膜。該基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠腫瘤組織提取的基底膜成分，所形成的基質(zhì)膠。該基質(zhì)膠主要成分為laminin，collagen IV，heparan sulfate proteoglycans（Kleinman et al. 1986）。同時(shí)，該基質(zhì)膠也包含多種生長因子，例如表皮生長因子EFG，血小板衍生生長因子PDGF，神經(jīng)生長因子NGF，堿性成纖維細(xì)胞生長因子FGF-2，乙型轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF（Vukicevic et al. 1992）。
產(chǎn)品來源：
Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠腫瘤基底膜成分
產(chǎn)品儲(chǔ)存：
建議您融化后先按照單次用量進(jìn)行分裝，保存-20°C冰箱，有效期2年。
產(chǎn)品性質(zhì)：
本品在4°C條件下為液態(tài)，但在加熱到37°C時(shí)呈凝膠狀態(tài)。基質(zhì)膠凝固后，重新放回4°C過夜，基質(zhì)膠可再次液化。
注意事項(xiàng)：
該基質(zhì)膠在溫度高于10°C時(shí)就會(huì)開始凝固成膠，所以盡量在冰上操作基質(zhì)膠。類器官傳代時(shí)，如果為了避免酶對類器官造成影響，可直接用4°C預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基對基質(zhì)膠進(jìn)行緩慢吹打，即可將類器官從基質(zhì)膠中釋放出來。
產(chǎn)品應(yīng)用：
本品適用于以無飼養(yǎng)層方法進(jìn)行人胚胎干細(xì)胞hES、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞ips的擴(kuò)增和維持。
操作方法：
人胚胎干細(xì)胞hES和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞ips無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法（操作所需時(shí)間為1小時(shí)）
1.將基質(zhì)膠于4°C冰箱里的冰浴中過夜解凍，并用預(yù)冷的槍頭，對基質(zhì)膠進(jìn)行緩慢吹打5次，進(jìn)行混勻。注意不要產(chǎn)生氣泡。如產(chǎn)生氣泡，通過掌上離心機(jī)低速短暫離心去除氣泡。
2.將細(xì)胞培養(yǎng)板放置于培養(yǎng)箱預(yù)熱。
3.用預(yù)冷的槍頭將解凍的基質(zhì)膠進(jìn)行分裝。
4. 用4°C預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基將基質(zhì)膠原液以1:100的比例進(jìn)行稀釋，然后將基質(zhì)膠稀釋液均勻鋪開并完全覆蓋培養(yǎng)板。推薦修飾培養(yǎng)板所用的基質(zhì)膠稀釋液的量為300µL/cm2。
5.將含有修飾液的培養(yǎng)板在室溫靜置一小時(shí)。
6.吸掉修飾液，并在培養(yǎng)板上立即種上干細(xì)胞與培養(yǎng)基（mTeSR1）混合液。注意一定不要讓修飾過的培養(yǎng)板表面變干。
