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兔骨髓基質(zhì)細胞

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  1. 細胞簡介:

    兔骨髓基質(zhì)細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細胞是一類具有多向分化潛能的干細胞,其中部分細胞有自我復制、高度增殖和多向分化能力,在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、心肌、骨胳肌、脂肪細胞、血管內(nèi)皮細胞等間葉組織細胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細胞在自然條件下主要分化為成骨細胞,在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同,其在成骨細胞與成脂細胞分化之間呈反向變化。

  2. 方法簡介:

    實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。

  3. 質(zhì)量檢測:

    實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

  4. 培養(yǎng)信息:

    培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
    產(chǎn)品貨號 P24443
    換液頻率 每2-3天換液一次
    生長特性 貼壁
    細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
    傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

    兔骨髓基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

    發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

    三、使用方法

    人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在技術(shù)部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

    客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

    2. 懸浮細胞處理

    1)收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀;

    3)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    4)若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰

    酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm離心5min,棄上清,

    收集細胞沉淀;

    5)加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察,用于實驗;之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

    四、注意事項

    1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。

    2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

    3. 消化過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

    4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

    5. 該細胞只可用于科研。

    特殊注意事項

    6. 此細胞為懸浮細胞,請注意不要直接倒掉,造成損失;懸浮細胞因多數(shù)胞體較小,離心收集時,請注意懸液中細胞是否收集完全,可適當加大離心轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)或增加離心時間3-5min,增加細胞獲取量。

    備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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