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細胞簡介：
兔皮膚肥大細胞分離自皮膚組織；皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細胞因子，參與免疫調節(jié)（T細胞、B細胞、APC細胞活化）。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質，可在組織內引起速發(fā)型過敏反應（炎癥）。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸，使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形，細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形，細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。
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方法簡介：
實驗室分離的兔皮膚肥大細胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
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質量檢測：
實驗室分離的兔皮膚肥大細胞經CD117免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號 P24456 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細胞形態(tài) 圓形 傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液 0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 兔皮膚肥大細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
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三、使用方法
人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈圓形，在技術部標準操作流程下，細胞不增殖；不傳代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 懸浮細胞處理
1）收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50mL離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液；
2）1200-1500rpm離心3min，棄上清，收集細胞沉淀；
3）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞；將分散好的細胞調整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4）若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2）中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結束后，加入胰
酶抑制劑(或血清）終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞；1200rpm離心5min，棄上清，
收集細胞沉淀；
5）加入5mL新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
6）待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察，用于實驗；之后再按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 消化過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑�，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
特殊注意事項
6. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失；懸浮細胞因多數(shù)胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5min，增加細胞獲取量。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考
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